RhoB تنظیم تکثیر سلولهای سرطان پروستات و حساسیت به دستاکسل از طریق مسیر سیگنالدهی PI3K AKT را برعهده دارد
خانواده ژنی همولوگ Ras، عضو B، که با نام RHOB نیز شناخته میشود، پروتئینی است که در انسان توسط ژن RHOB کدگذاری میشود. RHOB عضوی از خانواده پروتئینهای متصل شونده به GTP از خانواده Rho است.
داستاکسل به عنوان درمان خط اول در سرطان پروستات مقاوم به اختهسازی (CRPC) به طور گسترده مورد استفاده قرار میگیرد. RhoB، یکی از اعضای خانواده Rho GTPase ، نقش مهمی در متاستاز سرطان پروستات با تنظیم مسیر پیامرسانی PI3K-AKT ایفا میکند. این پروتئین در بازآرایی اسکلت سلولی، مهاجرت سلولی و پویاییهای چسبندگی کانونی (FA) حیاتی است. بهمنظور بررسی عملکرد RhoB در سرطان پروستات، از تکنیک ویرایش ژن CRISPR/Cas9 برای حذف ژن RhoB در سلولهای سرطان پروستات استفاده شد. موفقیت در ویرایش ژن با آزمون اندونوکلئاز T7 (T7EI) و تعیین توالی سنگر تأیید گردید. حذف RhoB موجب افزایش تغییرات اپیتلیال–مزانشیمی (EMT) و کاهش مقدار IC50 داستاکسل در سلولهای PC-3 فاقد RhoB شد که حاکی از افزایش حساسیت نسبت به داستاکسل است. علاوهبراین، حذف RhoB مهاجرت و تهاجم سلولهای سرطان پروستات را تحریک کرد؛ اثراتی که با بیان بیشازحد RhoB معکوس شدند. جالب توجه است که وضعیت RhoB تأثیر قابل توجهی بر چرخه سلولی این سلولها نداشت. توالییابی RNA در سلولهای PC-3 با بیان بیشازحد یا حذف RhoB نشان داد که RhoB مسیرهای مرتبط با FA ، تعامل گیرنده با ماتریکس خارجسلولی (ECM)، و سیگنالدهی PI3K-AKT را تنظیم میکند. این مسیرها به طور مستقیم بر EMT، مهاجرت و تهاجم سلولی در سرطان پروستات اثرگذار هستند. بیان بیشازحد RhoB موجب فعالسازی مسیر PI3K-AKT در شرایط تیمار سلولهای PC-3 با غلظت پایین داستاکسل (50 نانومول، 72 ساعت) گردید. این فعالسازی باعث کاهش سمیت داستاکسل شد که نشاندهنده احتمال ایجاد مقاومت دارویی از طریق فعالسازی مسیر PI3K-AKT میباشد.
در نتیجه،RhoB نقش چندوجهی در سرطان پروستات ایفا میکند؛ از جمله تنظیم تغییر اپیتلیالی-مزانشیمی(EMT)، حساسیت به DTXL، مهاجرت و تهاجم سلولی. حذف RhoB با استفاده از سیستم CRISPR/Cas9 منجر به اختلال در اتصالات سلولی و قطبیت پایه-رأس شد که باعث افزایش تحرک سلولی و حساسیت دارویی گردید. در مقابل، افزایش بیان RhoB موجب فعالسازی مسیر سیگنالدهی PI3K-AKT، مهار فعالیت Src ، و ایجاد مقاومت در برابر DTXL با دوز پایین شد.
ارسال نظر